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腺相关病毒(AAV)

  • 分类:研发总览
  • 发布时间:2020-02-18 00:00:00
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概要:
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  腺相关病毒(Adeno-Associated Virus, AAV)是细小病毒科的单链DNA病毒,需要通过辅助病毒才具有感染特性。目前已经从灵长类AAV中分离出13种不同的血清型,不同的AAV对组织和细胞的感染效果具有差异性,为组织器官的靶向治疗提供基础。重组的AAV具有安全性好、免疫原性低、宿主细胞广泛和体内表达外源性基因时间长的优点,因此被广泛应用于基因治疗、疫苗研究以及疾病模型构建。

     

 

AAV制备策略

 

  rAAV是一种缺陷型病毒,正常细胞中不发生产毒性感染,只有在辅助病毒共同感染时才能发生产毒性感染。所以rAAV载体的制备需要AAV元件、辅助病毒元件和宿主细胞三种成分共同参与。

 

AAV工艺流程

 

  AAV的生产是通过体外转染293T细胞的方式进行的,其制备和生产过程必须按要按照GMP要求进行。AAV工艺生产主要包括质粒制备、病毒包装和病毒纯化,在保证生产安全的条件下,最终病毒需要达到一定的滴度才能称为合格的产品。

 

质粒制备                    细胞                    培养病毒纯化                    纯化检测

 

 

AAV质量检测

 

  工艺生产的AAV需要经过严格的质量检测才能用于临床实验和医学用药,本公司生产的AAV根据相关法律法规以及国家药典进行质量检测,并制定出一系列的检测方法和质量标准。

 

 

AAV组织特异性

 

  基因治疗临床试验多采用病毒作为基因载体,提高载体的有效性和靶向性是研究病毒的重要内容。不同的血清型AAV载体的靶向组织具有差异性,因此选择合适的AAV载体能够大大提高基因治疗的效果。下表为了不同血清型的AAV及其特定靶向组织。


 
工艺库的建立
 

  为了生产符合GMP级别的AAV载体,本公司注重相关种子库的建立,并对种子库的质量严格把关,以保证产品持续稳定的生产。并且每一批病毒都具有编号,产品检测单,以保证产品的质量和可追溯性。

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